小鼠肝脏样本的细胞核提取

一、背景介绍

细胞核提取是分子生物学研究（如ChIP-seq、核蛋白分析、基因组研究等）的关键步骤。核维塔（NucVita）推出的柱式法细胞核提取试剂盒，通过优化裂解与纯化流程，可高效获取高纯度、结构完整的细胞核。本案例展示该试剂盒在小鼠肝脏组织样本中的实际应用效果。

二、实验设计

1. 样本准备

• 样本类型：C57BL/6小鼠肝脏组织（新鲜取材，-80℃保存）。

• 处理步骤：取50mg组织，预冷PBS清洗后剪碎，加入裂解缓冲液匀浆。

2. 试剂盒流程（核维塔 #NV001B-10）

1. 组织裂解：加入含蛋白酶抑制剂的裂解液，冰上孵育5分钟。

2. 离心过滤：去除未裂解碎片，上清液过柱。

3. 柱式纯化：结合DNA酶处理（可选），洗脱获得完整细胞核。

4. 质检：台盼蓝染色计数，BCA法测蛋白浓度，显微镜观察形态。

注：图片为台盼蓝染色后镜下图

三、结果与分析

1. 提取效率

细胞核得率：平均每50mg肝脏组织获得约2×10⁶个细胞核（台盼蓝活率>95%）。

2. 下游应用验证

ChIP-seq：使用提取的细胞核成功进行H3K27me3抗体免疫沉淀，测序数据显示信噪比优良（Q30>90%）。

电镜观察：核膜结构完整，无明显破裂（见图1）。

四、优势总结

• 高兼容性：适用于坚硬组织（如肝脏），克服传统研磨法的低效问题。

• 省时高效：全程约20分钟，较超速离心法缩短50%时间。

• 可扩展性：支持微量（10mg）至大量（200mg）样本灵活处理。

• 五、用户反馈

• “核维塔试剂盒的柱式设计显著减少了细胞质残留，后续RNA-seq的核转录组数据更纯净。”
  ——北京脑科学与类脑研究所表观遗传学课题组
  结论：核维塔细胞核提取试剂盒为小鼠肝脏等复杂样本提供了稳定、高效的解决方案，适用于高通量研究需求。

• 详细protocol及订购信息请联系16601113802 崔经理